期刊简介

  本刊由中华人民共和国卫生部主管,复旦大学神经病学研究所主办,本刊主要介绍国内外有关中枢、周围神经和骨骼疾病的基础研究,应用基础研究成果,并指导实践和临床发展。


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  • 杂志名称:中国临床神经科学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:复旦大学附属华山医院,复旦大学神经病学研究所
  • 国际刊号:1008-0678
  • 国内刊号:31-1752/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:万方收录(中), 知网收录(中)
中国临床神经科学杂志2015年第06期

利用CRISPR/Cas9技术将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因

徐铭;徐宏治;陈峻叡;秦智勇;陈衔城

关键词:CRISPR/Cas9, ALK1基因, 小鼠, 动静脉畸形
摘要:目的 将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因,拟通过Cre/LoxP系统条件性敲除Alk1基因建立脑动静脉畸形小鼠模型.方法 利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠Alk1基因:①设计和选择两个单导向RNA(sgRNA)分别识别外显子3~4和8~9的非编码区位点;②设计带有2个LoxP序列且与靶基因同源的供体载体;③将体外合成的sgRNA,Cas9 mRNA和供体载体注射到小鼠受精卵;④受精卵经假孕小鼠代孕出生后,经PCR和测序筛选目标小鼠.结果 小鼠Alk1等位基因的特定位点插入了LoxP序列.结论 CRISPR/Cas9技术能成功将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因,为建立脑动静脉畸形小鼠模型创造条件.