期刊简介
本刊由中华人民共和国卫生部主管，复旦大学神经病学研究所主办，本刊主要介绍国内外有关中枢、周围神经和骨骼疾病的基础研究，应用基础研究成果，并指导实践和临床发展。
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首页>中国临床神经科学杂志
- 杂志名称：中国临床神经科学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属华山医院,复旦大学神经病学研究所
- 国际刊号：1008-0678
- 国内刊号：31-1752/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中)
人肌肉生长抑素蛋白原核表达及纯化
陈慧敏；严旺；张顺
关键词：人肌肉生长抑素, 质粒, 基因重组, 原核表达, 蛋白纯化
摘要：目的:克隆人肌肉生长抑素(myostatin)基因并在大肠埃希菌中表达,纯化目的蛋白后制成冻干粉剂.方法:通过RT-PCR方法得到人myostatin基因的cDNA序列,构建重组克隆质粒pGEM5zf(+)myostatin-s及表达质粒pET32a (+)-myostatin-s,在合适条件下通过大肠埃希菌表达系统诱导表达并纯化该蛋白(myostatin-s),终制成冻干粉剂.结果:成功构建重组质粒,并经测序与GeneBank资料Myostatin (GI:2623581)序列完全一致.经异丙基-b-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导及纯化获得相对分子质量为33 000融合蛋白,并经Western blot证实后制成冻干粉剂.结论:通过重组基因片段可以获得纯化myostatin的成熟肽片段-融合蛋白myostatin-s,制成的冻干粉剂将为进一步人肌肉生长抑素免疫学研究奠定基础.
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